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A amostragem refere-se à quantidade de pixels que são usados para produzir os detalhes de uma imagem.
Isto deve-se ao facto de as imagens poderem ser manipuladas não existindo à posteriori um método de determinar a "ampliação" usada e impossibilitando-nos de ter noção da escala observada.
Uma imagem CCD é composta de minúsculos pixels quadrados. Cada pixel tem um valor de brilho que é atribuído um tom de cor cinza em cada imagem observada num monitor. Como os pixels são quadrados numa grande ampliação os contornos da forma serão apresentados em recorte de escada. Quantos mais pixels (resolução) e tons de cinza usados, mais suaves e nítidas as imagens serão.
Se a imagem apresentar irregularidades na sua forma sofre de Undersampling. Ou seja, não há pixels suficientes na imagem para apresentar correctante os detalhes. O número de pixels que formam a imagem é determinado pela relação entre a distância focal de um microscópio, o tamanho físico dos pixels (geralmente dado em microns, ou milionésimos de metro), e o tamanho da imagem capturada (geralmente dada em segundos de arco).
Uma captura digital de imagem em CCD pode ser controlada através da distância focal do microscópio e o tamanho do pixel da camara. Os microscópios vêm com várias distâncias focais. Da mesma forma, as cameras CCD vêm em uma variedade de tamanhos de pixel. Além disso, a maioria das cameras podem ser usadas em binning (somando vários pixels num pixel maior), dando ao utilizador uma variedade de tamanhos de pixels da camera.
Infelizmente, não temos tanto controle sobre o tamanho da imagem própriamente dita, que irá variar em cada captura.
A seguinte fórmula foi usada pelos alunos para determinar a amostragem de uma imagem:
A amostragem em segundos de arco = (206,265 / comprimento (focal em mm)) * (tamanho do pixel em microns)
ou
A amostragem em segundos de arco = (8,12 / (distância focal em polegadas)) * (tamanho do pixel em microns)
Conseguimos, assim, uma noção mais aproximada da dimensão das leveduras e das bactérias observadas. No nosso caso foi entre os 0,038 s e os 0,22 micron por cada pixel de imagem.
Desta forma podemos ter noção (contando os pixels) da dimensão de cada levedura ou bactéria.
Os resultados das medições foram, no caso das bactérias, de 5 a 8 microns de comprimento. |
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